《人工抗原遞呈細胞體外特異性擴增初始CD8T細胞的研究》是依託華中科技大學，由陳勝擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：人工抗原遞呈細胞體外特異性擴增初始CD8T細胞的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳勝
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
採用重組腫瘤抗原肽-MHC I方法，構建多種人工抗原遞呈細胞，模擬體內條件，在IL-2、 IL-4、 IL-7、 IL-15等細胞因子刺激及滅活自體外周血淋巴細胞滋養下，與HLA-A2陽性健康者外周血初始CD8+T細胞共培養，調整pMHCI/TCR、細胞因子等擴增信號，特異性擴增出腫瘤抗原特異性CD8+T細胞，檢測擴增的CD8+T細胞特異性，擴增指數，純度，特異性殺瘤作用及IFN-γ分泌活性，深入揭示初始CD8+T細胞特異性擴增的規律，摸索建立體外擴增初始CD8+T細胞的穩定方法，搶占國際免疫基礎、臨床套用研究制高點。
結題摘要
課題組分步驟成功構建了分泌性融合蛋白p-β2M-HLA-A2-Fc (pβA2Fc)，C1R/p-β2M-HLA-A2(C1R/pβA2)以及T2等多種人工抗原遞呈細胞。運用人工抗原遞呈細胞與腫瘤患者外周血CD8+T細胞共培養，通過檢測IFN-γ的分泌，我們檢測到非小細胞肺癌、乳腺癌、胃癌患者體內腫瘤抗原肽特異的CD8+T細胞，其中CEA 特異性CD8+T 細胞頻率最高，HER-2/neu 特異性CD8+T 細胞次之，而EGFR 特異性CD8+T 細胞較低。這些頻率較高的CEA、HER-2/neu 特異性CD8+T 細胞將進一步進行擴增實驗。 課題組進一步運用T2細胞結合CEA、HER-2/neu，在IL-2及滅活的自體淋巴細胞的滋養下，與非小細胞肺癌、乳腺癌、胃癌患者外周血PBMC共培養。多輪循環擴增後，這些CEA、HER-2/neu 特異性的CD8+T細胞被有效擴增出來。擴增指數由擴增前流式細胞儀難以檢測的0.0%到擴增後的1-8%。經過最佳化擴增條件，發現在濃度不高於40ng/ml 的情況下，添加的rhIL-2 濃度越高，腫瘤抗原肽特異性的CD8+T 淋巴細胞擴增越好，同時通過對不同的T2 細胞與PBL 的比例對擴增效果影響的研究，判斷出當T2 細胞：PBL=1：100 為最佳擴增比例。 課題組運用T2細胞和合成的腫瘤抗原肽作為人工抗原遞呈細胞，嘗試將多名健康者體內自發產生的腫瘤特異性CD8+T細胞擴增出來，但擴增的數量較低。 分析原因可能為健康者體內自發產生的腫瘤特異性CD8+T細胞數量極少，這極大增加了擴增難度。課題資助期結束後，我們將繼續調整T2細胞、抗原肽、細胞因子的濃度，進行進一步擴增。 該課題發表相關SCI論文一篇，培養博士生2名，碩士生1名。
