《二氫睪酮及睪酮調控EC及EPC促進內皮損傷修復機制研究》是依託中南大學，由蔡菁菁擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：二氫睪酮及睪酮調控EC及EPC促進內皮損傷修復機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：蔡菁菁
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
大型前瞻性研究結果和薈萃分析支持雄激素對心血管系統的保護作用。研究顯示內皮細胞（EC）及內皮祖細胞(EPC)的功能障礙是導致心血管事件的獨立危險因素。雄激素可能通過作用於內皮細胞與內皮祖細胞的增殖和功能而發揮調節心血管系統的作用。二氫睪酮、睪酮是兩種最強的內源性雄激素。研究證實其水平的降低可影響內皮的增殖能力，但對內皮祖細胞的增殖、分化能力的影響和機制卻不了解。本研究採用閹割小鼠及雄激素受體不敏感小鼠，同時利用人內皮、細胞內皮祖細胞，探討內源性二氫睪酮與睪酮對影響內皮細胞及內皮祖細胞增殖及功能的影響及其存在的調控機制。為血管損傷防治提供新靶點與新策略。
結題摘要
目的：本研究探討生理劑量範圍的雄激素作用於男性動脈內皮細胞的相關靶基因改變及其分子調控機制，同時探討調控靶基因所產生的生物學效應。在體內試驗中探討雄激素對血管損失後再內皮化及內膜增生的影響。方法及結果：研究發現二氫睪酮可促進HAEC中AR、VEGF、cyclinA及cyclinD1 mRNA表達增加。採用Casodex及AR siRNA可抑制雄激素誘導的HAEC細胞AR、VEGF、cyclinA、cyclinD1 mRNA及AR、VEGF蛋白的升高，阻斷細胞增殖及DNA合成。SU5416及VEGF-A siRNA可阻斷cyclin A mRNA表達升高, 然而SU5416對HAEC中VEGF mRNA表達及細胞培養液的VEGF濃度無明顯影響，而VEGF-A siRNA則可阻斷雄激素增加VEGF的濃度, 套用roscovitine可阻斷二氫睪酮誘導VEGF mRNA表達升高。小鼠體內試驗中發現雄激素的缺乏未明顯影響血管損失後內皮化及內膜增生。但我們發現HMGB1作為一種內源無菌性壞死物質，在內膜增生過程中起到了重要作用。成功構建誘導型HMGB1敲除（i-HMGB1-/-）小鼠，在頸動脈導管剝脫模型上驗證HMGB1缺乏對內膜增生具有保護作用，同時採用HMGB1中和抗體進一步驗證。同時在基因敲除小鼠體內驗證參與內膜增生的HMGB1相關受體的作用，發現TLR4參與炎症激活及內膜增生的過程。體外實驗進一步驗證HMGB1（0umol/l~5umol/l）激活巨噬細胞產生TNF-α，MCP-1，IL-6及PDGF，從而促進平滑肌細胞增殖；在巨噬細胞中加入TLR4抑制劑（Viper）後，此效應被阻斷。結論：本研究顯示二氫睪酮通過作用於AR調控血管VEGF與Cyclin-CKD從而發揮促進男性動脈內皮細胞增殖的作用。雄激素睪酮及二氫睪酮均可產生濃度和時間依賴性地促進HAEC細胞增殖及DNA的合成。本研究發現了雄性激素調控內皮功能的作用及生長相關機制，但在內膜增生模型中並未見有效的保護作用。在本研究中同時關注了無菌性炎症對血管損失的作用。發現 HMGB1炎症分子在血管損傷中介導的重要作用，通過激活其受體TLR4信號通路，使巨噬細胞浸潤增加並分泌炎症分子，促進平滑肌細胞增殖，而導致血管內膜增生。
