《不同S1P受體在HDL相關的缺血心肌保護中的功能研究》是依託上海交通大學，由陶蓉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：不同S1P受體在HDL相關的缺血心肌保護中的功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陶蓉
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
近年來我國缺血性心臟病的發生率有增高趨勢，心肌缺血的保護研究和如何套用於臨床成為熱點。本課題旨在探討高密度脂蛋白（HDL）中的1-磷酸鞘氨醇（S1P）在缺血心肌保護中的作用，不同S1P受體在HDL相關心臟保護中的地位。提取和分離不同S1P含量的HDL組分，在體外套用成年小鼠心肌細胞和內皮細胞，採用細胞計數法、蛋白印跡法、SiRNA細胞轉染法和定量PCR方法比較不同S1P含量的HDL組分處理組和對照組對缺氧細胞的保護作用，探討不同S1P受體亞型的功效。在體內套用小鼠心肌梗死模型，採用心臟超聲、蛋白印跡和免疫組織化學等方法，比較不同S1P含量的HDL組分處理組和對照組對心肌梗死面積、心功能和生存信號傳導通路的影響。本課題希望證明S1P是HDL發揮缺血心肌保護的關鍵，分離富含S1P的HDL組分套用於缺血性心臟病的治療，並且尋找到HDL作用靶點，為內科治療缺血性心臟病提供新的思路和手段。
結題摘要
中文摘要 【目的】近年來我國缺血性心臟病的發生率呈逐年增高趨勢，心肌缺血的保護研究和如何套用於臨床成為熱點。本課題旨在探討1-磷酸鞘氨醇（S1P）受體在高密度脂蛋白（HDL）的缺血心肌保護中的作用。 【方法】 套用順序密度超速離心方法和快速蛋白液相色譜層析法，提取和分離不同S1P含量的HDL組分，在體外培養成年小鼠心肌細胞，採用細胞計數法、蛋白印跡法、比較總HDL以及不同S1P含量的HDL組分處理組和對照組對缺氧細胞的保護作用，探討不同S1P受體亞型的功效。在體內套用大鼠心肌梗死模型，套用不同濃度的S1P受體激動劑FTY720干預。採用即時PCR方法、蛋白印跡和免疫組化染色方法，比較S1P受體激動劑處理組和對照組對心肌凋亡和生存信號傳導通路的影響。 【結果】 HDL能夠提高缺血狀態下的心肌細胞存活率，能夠激活MEK1/2-ERK1/2和PI3-K/AKT信號通路。HDL作用的強弱與S1P的含量成正相關，該作用能被S1P1/3受體拮抗劑VPC23019、Gi蛋白拮抗劑PTX、S1P3受體拮抗劑CAY10444所阻斷。心肌梗死模型中套用S1P受體激動劑FTY720能夠激活ERK和AKT抗凋亡信號通路，減少心肌細胞凋亡，減少心肌間質纖維化。 【結論】 HDL具有缺血心肌保護作用，通過S1P1和S1P3受體介導，激活ERK和AKT通路來完成。在心梗模型中，S1P受體激動劑FTY720同樣具有缺血心肌保護作用。該作用可能與其上調S1P1和S1P3的受體表達水平，激活抗凋亡的AKT和ERK信號傳導通路有關。
