《三陰性乳腺癌中ppar-gamma去甲基化研究及其臨床意義》是依託復旦大學，由江穎擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：三陰性乳腺癌中ppar-gamma去甲基化研究及其臨床意義
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：江穎
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
PPARγ在乳腺癌的發生髮展中起重要作用，是乳腺癌預後良好的指標之一。我們前期研究顯示，PPARγ在三陰性乳腺癌中表達降低可能與其啟動子DNA甲基化有關。推測PPARγ甲基化可能是導致PPARγ激動劑治療難治性乳腺癌失敗的原因之一。如果該構想成立，將會給三陰性乳腺癌患者的治療帶來新的希望。我們擬採用實時螢光定量PCR，Western Blotting，免疫組化等方法首先檢測三陰性乳腺癌中PPARγ表達情況，然後用甲基化特異性PCR(MSP)和結合亞硫酸氫鈉-限制性酶切法(COBRA)檢測三陰性乳腺癌PPARγ基因啟動子DNA甲基化狀態，再用去甲基化藥物及PPARγ激動劑單藥或聯合用藥對三陰性乳腺癌細胞進行干預實驗，研究其對三陰性乳腺癌細胞的體外增殖和體內成瘤性的作用，並進一步闡明其分子機制。該課題將為三陰性乳腺癌的藥物治療提供新的靶點和新的思路。
結題摘要
PPARγ在乳腺癌的發生髮展中起重要作用，是乳腺癌預後良好的指標之一。我們前期研究顯示，PPARγ在三陰性乳腺癌中表達降低可能與其啟動子DNA 甲基化有關。推測PPARγ甲基化可能是導致PPARγ激動劑治療難治性乳腺癌失敗的原因之一。如果該構想成立，將會給三陰性乳腺癌患者的治療帶來新的希望。我們採用RT-PCR，Western Blotting，免疫組化等方法首先檢測乳腺癌中PPARγ表達情況，結果發現，三陰性乳腺癌中PPARγ mRNA和蛋白表達明顯低於其他三種亞型的乳腺癌，表明三陰性乳腺癌中PPARγ 表達受到抑制。然後我們用去甲基化藥物肼苯噠嗪對三陰性乳腺癌細胞進行干預，發現去甲基化藥物明顯誘導三陰性乳腺癌中PPARγ 表達水平，表明三陰性乳腺癌中PPARγ 表達抑制與其啟動子DNA甲基化相關。接著用去甲基化藥物聯合PPARγ激動劑對三陰性乳腺癌細胞進行干預實驗，結果發現聯合用藥進一步提升了三陰性乳腺癌中PPARγ 的表達，說明在解除了三陰性乳腺癌中PPARγ 的表達抑制後，PPARγ激動劑更好的發揮了其配體激活作用。在此基礎上，我們進一步研究了去甲基化藥物和PPARγ激動劑對三陰性乳腺癌細胞生物學行為的影響，發現兩藥聯合明顯抑制三陰性乳腺癌細胞的體外增殖和體內成瘤性，並通過si RNA的干預實驗證實該抑制作用是通過PPARγ信號通路來實現的。最後，我們又對其分子機制加以研究，發現去甲基化藥物和PPARγ激動劑聯合用藥可明顯誘導三陰性乳腺癌細胞凋亡。該課題將為三陰性乳腺癌的藥物治療提供新的靶點和新的思路。
