一種辣椒素人工半抗原、人工抗原及其製備方法

專利背景

截至2014年4月25日，把非正常食用油（俗稱地溝油）摻入合格食用油中以獲取利益的行為屢禁不止，嚴重威脅著消費者的健康，成為當前中國食品安全領域亟須解決的問題。

國家科技部、工商總局、質檢總局、食品藥品監管局、糧食局以及中國疾控中心等7部委聯合攻關地溝油鑑定方法，主要包括：重金屬含量、多環芳烴、膽固醇、3-氯丙二醇及其酯、粘度、電導率、介電常數等，但由於地溝油來源多、成分複雜，截至2014年4月25日，檢測方法不能實現對通過白土吸附脫色、水洗、真空高溫脫臭等精煉處理，摻入正常食用油進行銷售的新型地溝油進行識別，迄今仍缺乏能夠有效鑑別方法。

中國傳統飲食習慣及口味愛好中辣椒是使用量較大、套用範圍廣泛的調味品，辣椒素是引起辣味的主要化學成分，主要存在於辣椒屬植物的果實及種子中。辣椒素具有脂溶性、強穩定性好、沸點高等性質，而餐飲行業的泔水油是地溝油的主要來源之一，截至2014年4月25日，地溝油加工工藝很難完全去除具有以上性質的化合物。正常食用油基本不含辣椒素，而接觸過辣椒的餐廚廢棄油脂難以避免地含有這類成分，因此辣椒素能夠作為鑑別餐廚廢棄油脂的特徵指標。辣椒素的檢測方法主要是高效液相色譜法（HPLC）、液質聯用法（LC/MS），需要對樣品進行稀釋、過濾、提取、淨化，操作複雜、繁瑣、檢測成本高、周期長，無法滿足大批量樣品快速篩查，尤其是現場快速檢測的要求。免疫分析是基於抗原、抗體的特異性反應的一種分析方法，在醫學上已廣泛套用於微量物質的檢測。免疫分析具有特異性強、靈敏度高、分析容量大、方便快捷、成本低廉等優點得到迅速發展。

建立免疫分析方法，首先必須製備出對辣椒素特異性強、親和力高的抗體。由於辣椒素分子量較小，不具備刺激機體產生針對辣椒素抗原決定簇的特異性抗體，作為小分子抗原其必須與大分子載體偶聯後才具有免疫原性。要實現與大分子物質的偶聯，半抗原分子上必須具備能共價結合到載體上的活性集團（如氨基、羧基、羥基和巰基等）。影響免疫分析方法的關鍵因素在於特異的抗原和抗體，因此獲得一種可免疫獲得特異性好，親和力高的辣椒素抗體的抗原具有十分重要的意義。