《一種莖環引物輔助的等溫核酸擴增方法》是川北醫學院附屬醫院於2021年4月2日申請的專利,該專利公布號為CN112980928A,專利公布日為2021年6月18日,發明人是羅光成、易婷婷、郭曉蘭、張國元。
基本介紹
- 中文名:一種莖環引物輔助的等溫核酸擴增方法
- 申請公布號 :CN112980928A
- 申請公布日 :2021.06.18
- 申請號 :2021103614170
- 申請日:2021.04.02
- 申請人:川北醫學院附屬醫院
- 地址:637000四川省南充市順慶區文化路63號
- 發明人:羅光成; 易婷婷; 郭曉蘭; 張國元
- Int. Cl.:C12Q1/6844(2018.01)I
- 專利代理機構:南充聚力三新智慧財產權代理有限責任公司51207
- 代理人:劉東
專利摘要
一種莖環引物輔助的等溫核酸擴增技術,其特徵在於,按下列步驟進行:a、SPA的引物設計:首先針對模板設計兩條普通引物,即正向引物FP和反向引物BP;b、設計好普通引物後,再在FP和BP的5’端添加莖環序列,形成一對莖環引物,即正向莖環引物SFP和反向莖環引物SBP;c、SPA引物混合液液配製:SPA的擴增引物由普通引物FP、BP和莖環引物SFP、SBP混合而成;d、SPA緩衝液配製2×SPAMix:稱取氯化鉀,硫酸銨,七水硫酸鎂,甜菜鹼,Tris‑HCl,dNTP,1.0 mL100倍稀釋的SYBR green Ⅰ,吐溫‑20,充分溶解並定容,每管分裝‑20°C保存;e、SPA反應液配製:SPA反應為10‑50µL體系。本方法具有操作簡單、快速靈敏、經濟實惠等優點,可實現核酸的快速擴增和檢測,特別適用於現場檢測和快速篩查。