《一種可溶性人腫瘤壞死因子Ⅱ型受體蛋白的製備方法》是上海市第十人民醫院於2021年2月24日申請的專利，該專利公布號為CN112921046A，專利公布日為2021年6月8日，發明人是陸一鳴、李安、王碩存、王俊傑、王勝。
基本介紹
- 中文名：一種可溶性人腫瘤壞死因子Ⅱ型受體蛋白的製備方法
- 授權公告號：CN112921046A
- 授權公告日：2021年6月8日
- 申請號：202110209711X
- 申請日：2021.02.24
- 申請人：上海市第十人民醫院
- 地址：200072上海市靜安區延長中路301號
- 發明人：陸一鳴; 李安; 王碩存; 王俊傑; 王勝
- 專利代理機構：上海領譽智慧財產權代理有限公司31383
- 代理人：王琰
專利摘要,國際專利分類號,
專利摘要
本發明涉及一種可溶性人腫瘤壞死因子Ⅱ型受體蛋白的製備方法；其主要包括構建shTNFR2的重組表達載體、轉化大腸桿菌獲得重組菌實現原核表達、菌體裂解獲得包涵體沉澱、包涵體沉澱的洗滌和蛋白變性處理、稀釋復性處理以及純化處理；其中，在構建重組表達載體步驟中，採用特定的引物擴增shTNFR2全長蛋白的基因片段，面對隨之帶來的純化操作中的困難，發明人做了大量的最佳化，發現在蛋白變性處理後，依次加入DTT和氧化型谷胱甘肽至特定濃度，對變性蛋白先後進行還原和氧化處理；在此基礎之上，稀釋復性步驟中，採用特定pH值和鹽濃度的復性緩衝液進行復性處理，最終獲得的純化後的shTNFR2蛋白具有高純度和較強的生物學活性。
國際專利分類號
Int. Cl.
C12N15/70(2006.01)I; C12N15/62(2006.01)I; C07K14/705(2006.01)I; C07K1/22(2006.01)I; C07K1/16(2006.01)I; C07K1/113(2006.01)I
